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制备药桑椹多糖及其体外抗氧化作分析
 
更新日期:2019-03-05   来源:食品工业   浏览次数:68   在线投稿
 
 

核心提示:药桑在植物分类学上属桑科、桑属、黑桑种(MorusnigraL.),是新疆药用果桑种质资源[1]。研究表明,药桑椹具有增强免疫力、抗氧化、延缓衰老等作用,多

 
 药桑在植物分类学上属桑科、桑属、黑桑种(Morus nigra L.),是新疆药用果桑种质资源[1]。研究表明,药桑椹具有增强免疫力、抗氧化、延缓衰老等作用,多糖则是其功效成分之一[2, 3]。目前药桑椹的开发利用仅限于果酒、果汁等初级农产品加工,附加值较低,药桑椹资源药用价值尚未得到合理开发利用,且相关基础研究滞后。本文将为后续深入探讨药桑椹生物活性提供依据,并促进药桑椹资源深度开发利用。

1 材料与方法
1.1 原料与试剂
药桑椹(Morus nigra L.)采摘于新疆维吾尔自治区和田蚕桑研究所,打浆破碎备用。 1, 1-二苯基苦基苯肼(DPPH)购于Sigma公司;总抗氧化能力(T-AOC) 测定试剂盒、羟自由基测定试剂盒购于南京建成生物工程研究所;维生素C标准品、浓硫酸、苯酚、95%乙醇、氯化钾等均为国产分析纯。
1.2 仪器与设备
HH-S型恒温水浴锅 河南巩义市英裕仪器厂;AL104 PL601-S电子天平、RE-52AA旋转蒸发器 上海亚荣生化仪器厂;SHB-III型循环水式多用真空泵 上海市试验仪器总厂;EZ-DRY冷冻干燥仪 美国FTS公司;Spectrum1ab53紫外-可见分光光度计 上海棱光技术有限公司。
1. 3 药桑椹多糖制备工艺流程[4]
新鲜药桑椹匀浆→石油醚脱脂→95%乙醇浸泡脱除黄酮→挥发有机溶剂、烘干→热水浸提→抽滤除渣→减压浓缩→85%乙醇沉淀→脱色、透析→冷冻干燥→精制多糖
1.4 药桑椹粗多糖制备
1.4.1 多糖得率的测定(苯酚-硫酸法)[5]
取1.0 mL多糖溶液定容到100 mL,作为样液,吸取样液1 mL于比色管中,加蒸馏水补至2 mL, 利用苯酚-硫酸法,测定490 nm下的吸光度。以葡萄糖为标准品,葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,制备葡萄糖标准曲线。根据标准曲线所得线性方程,求出多糖浓度C mg/mL,根据公式算出多糖得率:
多糖得率=(A/F)×f/m
式中:A为吸光度,F为葡萄糖与多糖换算因子,f为稀释倍数,m为药桑椹质量。
1.4.2 药桑椹多糖热水浸提的单因素试验[4]
称取10g新鲜药桑椹匀浆,设定浸提温度、浸提时间、料液比及浸提次数4个因素,进行提取。每次试验共提取2次,合并2次上清液,离心,真空抽滤除渣,将滤液用旋转蒸发器浓缩,浓缩液中加入4倍体积的85%乙醇,充分搅拌后置冰箱过夜沉淀。弃上清,8000r/min离心10min,收集沉淀,冷冻干燥后得药桑椹多糖。
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